Desinfección del explante: Se enjuaga con agua jabonosa y desinfecta superficialmente con hipoclorito de sodio al 10% 15 minutos. Se enjuaga con agua estéril tres veces.
Medio de cultivo para el establecimiento MS modificado: caseína hidrolizada (1 g/l); extracto de levadura (1 g/l); ácido giberélico (0,5 mg/l); IBA (1 mg/l); ácido cítrico (100 mg/l); agua de coco (5%); sacarosa (30 g/l).
condiciones de incubación: se realiza en medio líquido sobre puente de papel de filtro. Se agita diariamente durante una hora. Cada 24 h. Se transfiere a medio fresco. A partir del día 10 los cambios de medio se realizan cada 6 días. 26± 2 ºC, luz continua, intensidad 1000 lux. Duración del establecimiento: 3 meses.
Cuando los vástagos alcanzan 1,5 cm. de longitud los vástagos se transfieren al medio: Medio de intermedio antes de pasar a la etapa de multiplicación: Medio de cultivo para el establecimiento: MS modificado: caseína hidrolizada (1 g/l); extracto de levadura (1 g/l); kinetina (0,1 mg/l); IBA (1 mg/l); ácido cítrico (100 mg/l); agua de coco (5%); sacarosa (30 g/l); agar (5g/l). Los repiques se realizan cada 5 días.
BIBLIOGRAFIA:
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