Cuando se trabaja con cultivos microbianos, la técnica
aséptica se utiliza para prevenir la introducción de organismos adicionales al
cultivo. Se han desarrollado y
aplicado diversos procesos de desinfección y
esterilización para limitar o eliminar la presencia de microorganismos.
La esterilización es un método de eliminación total de cualquier forma
viviente, mientras que la desinfección es un proceso que elimina únicamente
formas vegetativas de los microorganismos.
La esterilización con
calor seco y húmedo
son los procedimientos de mayor utilización en
microbiología. El calor seco
desnaturaliza las enzimas y
destruye a los microorganismos por oxidación, por ejemplo al ponerlos directamente a la flama de un mechero
o en horno a 150-180° C durante 2 horas. Estos métodos se aplican
principalmente en la esterilización de asas de inoculación y todo tipo de
material de vidrio y quirúrgico.
Los procesos con calor húmedo
se aplican para esterilizar
medios de cultivo, soluciones y cultivos bacterianos que se desechan. El más recomendable
es la autoclave en el que se utiliza vapor de agua a presión para alcanzar
temperaturas de 121 ° C. El material se deja a esta temperatura durante 15 minutos para asegurarse de la
destrucción de endosporas, que son las
estructuras bacterianas más resistentes al calor. Para el caso de materiales
plásticos es recomendable el uso de gases como óxido de etileno o
con radiaciones gamma. Las
superficies generalmente se desinfectan con radiaciones U.V. o compuestos
químicos en forma líquida como: los fenoles, compuestos cuaternarios de amonio
(alquildimetil bencilamonio), formaldehído, alcoholes, halógenos y detergentes.
El tipo de microorganismo que será utilizado en este laboratorio serán
bacterias. Las bacterias se cultivan sobre materiales conocidos como medios de
cultivo. La composición química o
nutricional de los medios es extremadamente variada (Práctica Medios de Cultivo).
Los medios más comunes son los caldos
(medios líquidos), tubos con agar inclinado,
tubos con agar y cajas de Petri con agar o placas de agar. El agar es una
sustancia derivada de un alga marina que se solidifica como un semisólido tipo
gelatina. Cuando se añaden nutrientes
y otros factores de crecimiento, muchos
tipos de bacterias pueden cultivarse en él.
A menudo es necesario
tomar una muestra de bacterias de un tubo y colocarlas en otro.
El proceso
requiere cuidado y precisión, y se lleva a cabo siguiendo la técnica aséptica para
evitar que la bacteria en el tubo contamine el área de trabajo o a la persona
que lleva a cabo la transferencia.
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